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ArrayJet芯片点样仪推动植物多糖组分研究

 

芦荟凝胶是一类全球流行的日化、医用产品,可修复皮肤划伤、淡化疤痕、消炎抗菌等,其功效源于芦荟含有的天然生物活性多糖。据统计,25%的芦荟属植物应用于传统医学,表明芦荟中的生物活性多糖成分可能在整个芦荟属中普遍存在。然而多糖的复杂性给开发芦荟产品,以及建立相关的分析方法带来了极大挑战。近些年,糖芯片微阵列检测可作为一种分析多糖成分的有效方法。本研究的目的,则是使用糖芯片微阵列对两种药用芦荟和两种非药用芦荟随季节变化的多糖组成进行研究,从而对商业种植获取不同种类芦荟多糖优化的收获时间提供建议。

该文章发表于Frontiers in Plant Science杂志,研究者对4种芦荟属植物进行多糖成分研究。植物生长在玻璃容器中,取样时均已成熟,其生长条件模拟野外环境,包括日照变化和土壤水分含量等。如(表1):

芦荟样本获取于2017年6月26日至2018年6月25日,每月采集3次。为了降低酚类化合物污染的风险,作者仅收集了芦荟内部的叶肉用于制备糖微阵列芯片,样本取出后立即放置在带有标签的EP管中,并在液氮中快速进行低温冷冻,冷冻后在-20℃下保存24小时,随后干燥并称重,用玻璃珠在组织裂解液中研磨,最后提取,操作步骤如图1:

提取分三步进行,首先根据每个样品的重量计算萃取剂体积,萃取比例10mg样品加300μL萃取剂。使用溶剂如下:

1.dH2O提取可溶性或未结合以及松散结合的多糖,主要是甘露糖;

2.50mM CDTA主要提取果胶和半纤维素;

3.4mM NaOH主要提取半纤维素。

提取后,样品以4000RPM离心10 min,然后取上清液,转移到已标记的EP管中。每个样品用Arrayjet缓冲液(55.2%甘油,44%水,0.8% Triton X-100)进行稀释,随后加入384孔板中,并以3000RPM离心10 min,使用英国ArrayJet公司的生物芯片点样仪将样品点印在硝化纤维素包被的玻片上。使用15个可以与果胶和半纤维素多糖结合的单克隆抗体作为一抗进行孵育,二抗选择鼠来源的碱性磷酸酶与一抗进行结合。

统计结果如图2:横列为15种与不同多糖结合的一抗以及阴性对照,纵列为四种芦荟植物在不同季节的分类,数值为二抗结合信号的平均值。

结果发现不同种属的芦荟属植物在不同季节多糖表达有明显的差异,而糖芯片检测有可能作为一种直接靶向相关多糖存在和研究多糖组成的筛选方法。

原文链接:https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2019.00512/full

ArrayJet位于英国爱丁堡,专注于提供生物芯片应用领域的解决方案及服务。自2000年公司成立即致力于开发新型生物样品喷点方案–喷墨式液体处理平台,该系统于2006年上市,目前用户遍布全球27个国家。

Mercury系列产品采用独特的飞行喷墨点样技术实现行业第一的快速、非接触式微量液体处理。同时上万种不同样品可以进行快速点样,专利的上样模块配合高通量的点样喷头保障您的点样操作快速、无污染,更低的上样体积可有效减少样品损失,使您的珍贵样品物尽其用。

 

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